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硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

硫氧還蛋白還原酶是一種NADPH依賴的包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶，屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員。
 

硫氧還蛋白還原酶 thioredoxin reductase和硫氧還蛋白、NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng).TrxR有很多生物學(xué)功能,與人類某些疾病的發(fā)病機(jī)制也密切相關(guān)。

由還原型 NADP催化硫氧還蛋白還原的酶。EC1．6．4．5．。含有一個(gè)分子的FAD。使氧化型硫氧還蛋白的胱氨酸殘基還原，變成一對(duì)半胱氨酸殘基，后者進(jìn)一步成為核糖核苷酸還原的電子供體。它存在于大腸桿菌、酵母、肝臟以及腫瘤細(xì)胞中。
產(chǎn)品說(shuō)明：TrxR是一種NADPH依賴的包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR與GR活性類似,催化GSSG還原生成GSH,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。
TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412nm有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定412nm波長(zhǎng)處TNB的增加速率,即可計(jì)算TrxR活性
操作步驟：
一、粗酶液提取
1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。10000rpm,4℃離心10min,取上清置冰上待檢測(cè)。
2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3s,間隔7s，總時(shí)間3min),然后10000rpm,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）實(shí)驗(yàn)代測(cè)